手性色譜柱(Chiral HPLC Columns)是由具有光學(xué)活性的單體,固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相(Chiral Stationary Phases)。手性色譜柱在使用過程中可能會遇到以下常見問題:
1、柱壓值增加將會提高手性色譜柱的效果。
手性柱壓力升高的原因可能是由于流動相中醇含量過高,或液相通路受阻,或柱頂沉淀有樣品,又或填料被壓縮導(dǎo)致柱頂坍塌等。針對不同原因應(yīng)有針對性的措施。若是醇含量高,可調(diào)整溫度或流速。若液相通路堵塞,則需清理。如柱頂沉淀有樣品,則需使用流動相溶解樣品及預(yù)處理以去除易沉淀成分。填料被高壓壓縮而導(dǎo)致柱頂坍塌,則需更換新手性柱。
2、手性柱屏譜中異構(gòu)體分離效果降低
分離效果降低的原因可能是由于色譜條件發(fā)生變化,或者柱效受損。首先要檢查是否外部因素如溫度、流動相等發(fā)生了變化,導(dǎo)致分離效果下降,若排除了外部因素,則可能是柱效下降所致。若分離效果在短時間內(nèi)急劇下降且柱壓升高,可能是由于極性溶劑損害了柱子;若分離效果在較長時間內(nèi)逐漸下降,可能是由于柱頭污染或崩塌,需更換保護柱或分析柱。
3、手性柱的使用壽命較短
手性柱的使用壽命受到多種因素的影響,如流動相的成分、樣品的性質(zhì)、色譜條件等。為了延長手性柱的使用壽命,我們應(yīng)該注意以下幾點:首先,避免使用強酸、強堿等極端pH值的流動相,因為這些條件可能會破壞手性固定相的結(jié)構(gòu)。其次,盡量避免使用高濃度的有機溶劑,尤其是極性溶劑,因為這些溶劑可能會溶解固定相。最后,定期對柱子進行清洗和維護,以保持其良好的工作狀態(tài)。
4、手性柱的分辨率不足
分辨率是衡量手性柱性能的重要指標(biāo)之一。如果手性柱的分辨率不足,可能是由于柱溫過高、流動相流速過快、樣品濃度過高等原因所致。為了提高手性柱的分辨率,我們可以嘗試降低柱溫、減小流動相流速、降低樣品濃度等方法。此外,還可以通過優(yōu)化色譜條件,如改變流動相組成、添加添加劑等,來提高分辨率。
總之,手性色譜柱在使用過程中可能會遇到各種問題,我們需要了解這些問題的原因和解決方法,以確保手性色譜柱的正常使用和分離效果。同時,我們還應(yīng)該注意維護和保養(yǎng)手性柱,以延長其使用壽命和提高分離效果。
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