手性色譜柱(ChiralHPLColumns)是由具有光學(xué)活性的單體固定在硅膠或其他聚合物上制成的手性固定相(ChiralStationaryPhases)。通過引入手性環(huán)境,對映異構(gòu)體呈現(xiàn)物理特征的差異,從而達(dá)到光學(xué)異構(gòu)體拆分的目的。為了實現(xiàn)手性識別,手性化合物分子與手性固定相之間至少有三種相互作用。這種相互作用包括氫鍵、偶級-偶級、π-π、靜電、疏水或空間。手性分離是多種相互作用的結(jié)果。這些相互作用通過影響包埋復(fù)合物的形成、特殊位點和分析物的鍵合來改變手性分離結(jié)果。由于這種力較弱,需要仔細(xì)調(diào)整和優(yōu)化流動相和溫度,以達(dá)到良好的分離效果。
在手動拆分中,溫度的影響非常明顯。低溫增加了手動識別能力,但可能會導(dǎo)致色譜峰變寬,導(dǎo)致分離差。因此,在確定手動分析方法的過程中,應(yīng)考慮柱溫度的影響,并確定zui最佳柱溫度。
到目前為止,還沒有類似于十八烷基鍵合硅膠(ODS)柱的普遍手動柱。不同化學(xué)性質(zhì)的異構(gòu)體必須使用不同類型的手動柱,而市場上的手動色譜柱通常很貴,所以根據(jù)化合物的分子結(jié)構(gòu)選擇合適的手動色譜柱是非常重要的。
IrvingWainer根據(jù)手性固定相與溶劑的相互作用機(jī)制,首次提出了手性色譜柱的分類系統(tǒng):
第一類:通過氫鍵、π-π、偶級-偶級形成復(fù)合物。
第二類:既有類型1中的相互作用,又有包埋復(fù)合物。這種手色譜柱通常由纖維素及其衍生物制成。
第三類:基于溶劑進(jìn)入手性空穴形成包埋復(fù)合物。最典型的手色譜柱是由Armstrong教授開發(fā)的環(huán)糊精手色譜柱[2]。此外,由聚苯甲基甲基丙烯酸酯等冠醚手色譜柱和螺旋聚合物形成的手色譜柱也屬于這一類。
第四類:Davankov開發(fā)的手性分離技術(shù)是基于形成非對映體的金屬絡(luò)合物,又稱手性配位交換色譜(CLEC)。
第五類:蛋白質(zhì)手性色譜柱。手性分離是基于疏水和極性的相互作用。
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